مواد و روش ها
ژنوتيپ والدين . در قسمتي از برنامه هاي وارد سازي ژنوتيپ هاي انتخاب شده با پتانسيل ژني مناسب گندم نوروژي  توانستيم 3 لاين براي زودرسي انتخاب شدو همچنين 3 تا براي مقاومت به بيماري  و كيفيت اين 6 نوع ژنوتيپدر دانه مورد آزمايش نوروژي كشت شدند(جدول زيرراببينيد كه نشاندهنده وضع طبيعي اين ژن هاست.
لاين هاي تكي توارثي دانه . SSDs توليد شده از F i در گلخانه  كه توليد شده از F 2' F 3' و F 4است در جعبه هايي 55 در26در6 متر وبا جعبه هاي نگهداري دانه در تعداد 4 و6 جعبه با 9 بذر تلاقي داده شده سپس دو دانه از ميان هر نسل انتخاب و برداشت شد در مقدار بالاي SSDs بترتيب بعد از كاشت مجدد اين دانه ها در جعبه هايي ديگر اين بار انتخاب را درون گونه اي انجام داده و باز هم تعدادي بذر جدا ميكنيم درنهايت براي آخر كار بطور تصادفي 100 نتيج دانه هارا كه محصولي از تك لاين گياهان بهاره و پاييزي 1989 در نسل ششم در آزمايشگاه كشت كرديم.
لاين هاي دابل هاپلوئيد. محققان براساس توليدات آزمايشگاهي وواكنش هاي ان اينگونه شرح دادند در طي دوره ژانويه تا ژوئيه 1988 در رشد بساك نسل F1 در محفظه هاي رشدگلخانه ها با دماي كنترل شده در رنج 12 تا18 در اين حلت تعداد  لاين هاي آناليز شده و مشابه والدين بطور كلي بيشتر بود در آغاز تمام گياهان براي سطح پلوئيدي  تا جدا شدن كروموزوم ها روش هاي گوناگوني بكار برده شد در نوك ريشه كروموزوم ها در مرحله متافاز و اينترفاز سلول بصورت عمومي 1 تا2  هاپلوئيد و 3تا 5 ديپلوئيد بود به همين دليل براي تمام گياهان تيمار شده در ازمايشگاه از كلسي شين استفاده شد براي دابل كردن تعداد كروموزوم ها ي در حال رشد به صورت هورموني و نرمال  و انها را در  پتري هاي 4 تا 5 سايزي و در دماي 15 تا2 و به مدت 1 تا 2 هفته  با يك پوشش پلاستيكي  رشد داديم اين كار باعث تضمين ماندگاري بالا در حد 80 تا 90 درصد نمونه ها شد دانه هاي تيمار شده با كلسي شين در طي زمستان 1988-89 به رشد خود ادامه دادند.
نشانه هاي ژنتيكي . دانه هاي والديني  براي تغيير دادن در وزن گلوتن و پروتين و ميزان  سديم  خود انتخاب شدند و با الكترو فورز آزمايش شدند كه ميزان پلي آكريل اميد انها مورد بررسي قرار بگيرد به همين دليل نتاج دورگه هم براي اناليز بهتر در همين زمينه ها انتخاب شدند كه در اين آزمايش x انحراف معيار rماده شيميايي  تععين شد در هر بار استفاده 3 دانهمورد اناليز قرار گرفت سپس هر دانه بطور تكي توسط ماده كبالت نيز مجددا آناليز شد و ديده شد دانه هاي موجود داراي خطوطي روي ژل الكترو فورز هستند كه والدين فاقد اين خطوط بودند در واقع اين خطوط بيان گر ان قسمت از ژن هاي مقاومت مد نظر بودند كه در نزديك سر قطب مثبت دستگاه نمايان شده بودند( در باند 2آ و 2ب ) در قسمت هاي B, S, D و R چنانچه در جدول 2 هم مشاهده ميكنيد در گرو ههاي يك و سه و پنج شرح داده شده است ژنوتيپ هاي مربوط به جدول يك در زير تسليم شده است كه سافچه ها  براي آزمايش نمونه ها بكار برده شده  و براي تلاقي و در جه انحراف معيار انهم از نيم هاي ارغواني R x S  كه تحت اثر محيط و ژنتيك بوده استفاده شد در نوع ژنوتيپ r دورگه با تلاقي r *ms كه صفت تيرگي را همراه دارد همچنين با تلاقي R x Hand R x WW براي مقاومت زنگ زرد  گياهاني 100 عاري از بيماري  ومقاوم توليد شد در هر تلاقي يك ژن اصلي به عنوان صفت بارز انتخاب و جدا شد تا به نوع و ژنوتيپ مد نظر بتوانيم برسيم در جدول 2 3 4  اناليز چگونگي انتقال صفت تسليم شده استفراواني لوكوس ها نيز  با وجود عدم تعادل گامتي با كنترل 2 لوكوس تعيين شد توسط تحقيقات انجام گرفته با اشعه ايكس درجه اطمينان آزمايشات نيزاينگونه تععين شد 0.05 < P < 0.10
بحث و نتايج
در تلاقي R x S
 يك واكنش تعجب آور در دادهااناليز 86 دابل هاپلوئيد 21 تغيير پذيري پيش بيني شده بود كه داراي الل هاي مختلف براي يك صفت خاص  بود اما اين پديده اينچنين در SSDsمشاهده نشد زمانيكه اين پديده اتفاق افتاد معلوم شد دورگه هاي هاپلوئيد به عنوان سرفصل جديدي در رفتار كه در جدول 2 امده داراي متغيير هايي هستند كه باعث آميختگي شده و مفهوم اين اينست كه در اين آزمايش درجه تست x2 گرفته شده بوددر بيشتر لاين ها نيز به وضوح ازدياد رشد تاخيري مشاهده شد كه در گياهان بي ريشك نامناسب اما براي گياهان ريشك دار تقريبا مناسب بود اين صفت  همچنين در هومزيگوت الل ها نيسبت  1:1 ديده شد همچنين در لاين هاي 2 اوكوسي نيز اين تعادل وجو داشت
تلاقي هاي R x B 
 در همه دابل هاپلوئيد  انتظار منحرف شدن از مسير پيش بيني شده وجود داشت مانند سطوح10درصدي اكو  ب 1 در  SSDs  كه البته بطور جالبي  الل DHs, 7 9 را داريم كه بساك از والد كشت شده درحد چشمگير تري بود كه در جدول 3 نتايج را ميبينيم كه تاحدي 7+9  دانه ها مازاد بر 7+8/7+9  هتروزيگوزيتي دارند كه يك مزيت نسبت به والدين است كه باعث انتخاب پيوسته نيز ميشود
تلاقي هاي R x WW
  در اناليز 41 دابل هاپلوئيد (جدول 4 آ) مثل قبل 35 درصد موارد هموزيگوت هستند كه در دادها قابل مشاهده است در Glu-AI و Glu-BI دادها نيز از انتظار منحرف شده و چشمگيرترين نتيجه مقاومت به زنگ زرد  بود والد حساس  نيز 31.4 درصد درحاليكه  والدين نوع WW2525T كاملا مقاوم بودند كه شايد اين نسبت 1:1 با يك درصد اضافه از آثار فنوتيپي باشد كه در كاليبراسيون اين عدم تعادل گامتي نيز مشاهده ميشود
تلاقي  R x D  .
 در 101 نمونه دابل هاپلوئيد آناليز شده ( جدول 4ب) 21 لاين نشان داده تغيير پذيري پيش بيني شده را نشان دادند براي Glu-A I در مشاهدات بدست امده در Aco-Bl در SSDs يك مازاد بر انتظار از 3ا/3آ  ژنوتيپي نيز وجود داشت در اين انحراف از معيار در اينجا ديگر نتيجه عدم تعادل گامتي نبود
تلاقي R x MS و R x H .
 اين تلاقي براي نوع بدون ريشك استفاده شد  هر دوي SSDs و DHs نيز با توه به انتظاري كه داشتيم در ژنوتيپ خود با اظافاتي روبرو شدند در تلاقي آر و اس  ديديم كه اين نسبت اظافات با يك درصدي تحريف و خطا روبرو بود اما در اينجا اين خطا داراي جهت و سمت و سو است (جدول 5) در تلاقي آر- اچ   يك تفكيك كيفي براي مقاومت به زنگ زرد نيز مشاهده شده كه در كلاس كمتري نسبت به تلاقي آر- دبليو است ( شكل ج) اين فاكتور تفكيك نشان داد  كه اگر لاين هايي با 10 % آلودگي  و 15 % كمتر مقامت دارند نسبت به انواع ديگر
تغييرات غير منتظره
در نتاج هر يك از تلاقي هاي فوق نتاجي غير منتظره كه حاصل استفاده از مواد بيو شيميايي بود نيز ديده شد اناليز مقدار بين R x S DHs نشان داد كه هتروژنوس در تعداد كمي رخ داد كه در گونه هاي بي ريشك و ناهمگن رخ داد ضمن اينكه در برخي گونه هاي دورگ حضور الل هاي بيگانه نيز مشاهده شد  در تلاقي آر-اس نيز وجود الل هاي بيگانه  و در لاين هاي تلاقي آر-بي نيز باز مشاهده شد گندم لازم نيز در تحقيقات در گلخانه  نيز در محيطي  دقيق بود اما بنظرز ميرس دگر آميزي  كبالت مشكل ايجاد اين الل ها باشد  اگرچه اثر اين مواد در واكاوي هاي صورت گرفته  مشخص نشد اما در يك مورد 5 دانه اي كه درو كرديم  برخي از هترو زيگو سيتي ها ارثي تلقي شد در بقيه موارد هيچگونه ناهمگني  غير منظره آشكار نشد نكته ديگري كه ميتوانست منجر به خود باروري شود رسيدگي همزمان گل ها بود علي رقم حساسيت دانه ها به عدم رسيدگي همزمان كه دانه هايي نر عقيم توليد شده بوسيله كلسي شين راه آن بود در چند پلوئيدي  تنظيم گياهان ساب فرتيل (زير زايا) فقط تعداد كمي دانه و چندين گل ممتد  از مشخصه هاي انها بود بهر حال تشكيل بذر در همه DHs ( نتايج قابل مشاهده نيست) و وجود داشت و امتياز گياه بارور پيدا شدن الل هاي بيگانه در ان بود. فنگ و آيو وانگ 1989 يافتند كه DHs ديپلوئيد گندم  كاملا نازاست در صورتيكه  به وضوح گياهان هاپلوئيد در برخي حالات  اينطور نبودند پس در كل در انتشار نتايج بايد گفت
1 . ما ابتدا به سختي توانستيم همبستگي  پلوئيدي با دانه جور كنيم (بخش مواد و روش ها)
2. پيچيدگي كشت بساك در گندم  و سلول زايي  در لاين هاي گندم و جو  در توليد DHs  با هوردئو بلبوسوم  كه داراي الل هاي مختلف براي يك صفت هستند و تنها در يك زمينه مستعد به دگر آميزي بودند را داشتيم  همچنين در گندم ممكن است منشا اصلي  بيشتر مورد توجه است كه كدام گونه بوده  كه مشاهدات حاكي از وجود گونه اي نامعين ميدهد  كه ميزان دانسته هاي ما از اين مورد خيلي كم است همچنين در جمعيت هاي كوچك اغلب تلاقي هاي منحرف شده متناسب است
نقش انتخاب در SSDs و DDs توسط WEBER
WEBER در 1990 خاطر نشان كرد كه چگونه تاثير انتخاب در هريك از [SSD or DH اين روش ها از منع اصلاح پشتيباني ميكند بنظر ميرسد كه بطور ضمني  هميشه اين روش نميتواند تنها راه تععين ژنوتيپ باشد حتي با اجتناب از وسواسي باز انحراف ها وجود دارد در يك مورد Glu-BI دادها از R x B در تعيين انتخاب جهت دار و مزيت هاي هتروزيگوتي ممكن است باشد در تلاقي هاي مركب جو نيز مقدار زيادي مدرك است  كه هتروزيگوت ها بطور پايه اي و مازاد  تنها در برخي مواقع خود ناسازگاري بدهند آشكاراست يك نقش انتخاب گامتي شايد استفده از ابزار SSDs باشد كه بطور شگفت انگيزي در اين مود هنوز اطلاعت كافي نيست و بايد بيشتر در مورد اينترگامتيك و اينتر ژنوتيپ مطالعه كنيم بهرحال بايد زمانيكه DH دادها يمان كامل باشد ميتوان انتخاب را در شرايط آزمايشگاهي انجام داد يك پيش بيني آشكار  در مورد هترو زيگو سيتي و هتروژنتيكي در صورت رعايت كامل باز هم با عدم قطعيت كامل روبه رو است در كل موارد زير مهمترين نتايج براي  وراثت شناسي و محدوديت هاي احتمالي آن است
1. نهال زايي نشان از نوعي امتياز و OHs فقط نشانه اي از تنظيم مطلوب دانه است
2. ممكن است جنين/كالي فرمي از از يك بساك  در كلون كردن اثر گذاشته  و نسبت ها را تغيير دهد كه اين عمل حفاظ بر اين است كه تنها يك  جنين از ميان بساك ها  در اين آزمايش امده
3. يك ارزيابي دقيق شرايط آزمايشگاه و انتخاب  در تعداد زيادي كروموزوم و تلاقي هاي متفاوت  با توجه به 2 نقطه عطف رشدي دانه باشد كه همين امر ميتواند در دادها در مورد SSDs  ايجاد اختلاف با آنچه مد نظر ماست داشته باشد در دابل هاپلوئيد  نيز نشانه  از همان اكتساب موجود در دانه باشد.
در 17 تلاقي  لاين هاي خالص  وآميزش اناليزشده 7 مورد مشاهده شد كه SSOs در DHs است در 2 مورد نيز بطور موازي انحراف در 2 گروه Aco-B 1 in R x S, Glu-Bl in R x B و در يك مورد هم برعكس انحراف  در تلاقي  مابين R x MS وجود داشت در اغلب موارد هم  فقط يكي از سيستم هاي DH or SSD  بطور همزمان دچار انحراف شدند
با اين ذهنيت اين تصور در ذهن ايجاد ميشود كه  كشت بساك  با يك گامت براي وارد كردن الل مورد نظر بواسطه تلاقي ممكن باشد در رقم بهاره چيني مونوسوميك توسط دي بايسر در شرايط ازمايشگاهيانتخاب گامتي در شرايط لقاح طبيعي در سال 1989 انجام شد كه نتايج ان نشان داد كه عمل انخاب بطور كامل خنثي شده نيست  و همان دادها نشان ميدهد كه مشاهدات متضاد با انچه كه تصور ميشد است بررسي حاضر نيز نشان ميدهد كه چه موقع صفات كمي در SSDs  به منظور دابل هاپلوئيد  قابل قياس بوده و اين روش ميتواند منبع و راه درستي براي تكثير لاين هاي خالص مطلوب باشد ضمن اينكه در جو ماديديم كه لاين هاي هرديوم بلبوسوم  رضايت بخشترين نتايج را در مطالعات داشتند  شايد لاين هاي گندم رائه شده  در تلاقي ها ي بين گونه اي و دورگ گيري بيشترين اثر را در كشت بافت بساك و دابل هاپلوئيدي داشتند.